摘要
目的体外组装补体膜攻击复合物(membrane attack complex,MAC),建立肾小管上皮细胞HK-2亚溶破模型,为进一步探讨小管间质的免疫性损伤效应奠定基础。方法用酵母多糖激活急性期患者血清制备补体优球蛋白C56,以新鲜正常人血清(NHS)作为C7~C9来源,体外组装s MAC建立HK-2亚溶破模型,LDH检测评价细胞亚溶破剂量,激光共聚焦显微镜(LSCM)鉴定s MAC沉积,流式细胞仪检测s MAC对HK-2表面HLA-DR分子表达的影响。结果确定C561:480,NHS 1:20为HK-2最适亚溶破量;LSCM显示s MAC沉积于HK-2细胞表面;不同时相观察s MAC刺激后HK-2细胞HLA-DR表达量逐渐升高,HLA-DR比对照组显著增加(P<0.01)。结论成功建立了肾小管上皮细胞补体膜攻击复合物亚溶破模型,补体活化可能导致TEC本身参与了免疫炎症效应。
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单位第三军医大学; 第三军医大学新桥医院