EID3参与调控人脐带间充质干细胞转分化为类神经干细胞过程的研究

作者：陈文锦; 罗亮; 张丽; 殷勤伟; 徐如祥

来源：中华神经创伤外科电子杂志, 2018, 4(01): 33-39.

• 间充质干细胞
• 转分化
• 甲基化

目的研究P300抑制蛋白E1A样转分化抑制蛋白3(EID3)在脐带间充质干细胞(UMSC)转分化为类神经干细胞(u NSCLs)过程中的表达变化及EID3和DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)之间的相互作用关系。方法 (1)通过免疫学实验研究UMSC和uNSCLs细胞表面抗原特点;(2)通过表观遗传学基因检测、蛋白印记实验评价EID3与DNMT3A在UMSC、uNSCLs、神经干细胞(NSCs)中表达量的关系;(3)通过免疫共沉淀实验研究EID3和DNMT3A在UMSC转分化为u NSCLs过程中的相互关系。结果 (1)u NSCLs高表达NSCs的相关m RNA,在Nestin、Psx6、Vimentin、GFAP、Musashi1和Neuro D1基因m RNA的水平上较UMSCs增加了313.2倍,差异具有统计学意义(t=9.925、14.089、4.303、8.994、10.122、22.327、1.876;P=0.018、0.0005、0.026、0.0003、0.017、0.002、0.258);(2)在UMSCs转分化为u NSCLs的过程中,EID3的表达量降低,而DNMT3A则增高,DNMT3A的mRNA水平上在uNSCLs和NSCs中的表达量明显高于UMSCs,差异具有统计学意义(tuNSCLs=7.453,PuNSCLs=0.006;tNSCs=12.924,PNSCs=0.001),蛋白水平检测发现,UMSCs转分化为uNSCLs前后,EID3表达降低而DNMT3A则增高,呈相反关系;(3)在u NSCLs细胞中,EID3和DNMT3A共定位于细胞核中,在u NSCLs细胞中,EID3直接结合DNMT3A,并且,HEK293细胞内转染的外源性EID3和DNMT3A同样能相互结合。结论在UMSCs转分化为u NSCLs细胞的过程中,EID3的表达量逐渐增加并伴随着DNMT3A的表达量逐渐下调,同时两者发生直接结合作用,EID3参与调控了UMSC向uNSCLs的转分化过程。

• 单位
  中国人民解放军陆军总医院