摘要
目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与破骨细胞形成之间的关系。方法采用结核菌素(PPD)诱导RAW264.7小鼠单核巨噬细胞,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法观察破骨细胞的形态并计数破骨细胞形成的数量,实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞内TNF-α基因的表达,Western blot检测细胞内TNF-α蛋白的表达,采用Pearson相关分析TNF-α的表达量与破骨细胞形成数量之间的关系。结果采用PPD成功诱导出具备特定形态学特征的破骨细胞,PPD诱导第1、4和7天,破骨细胞形成的数量分别是(1.500±0.550)、(7.500±1.870)和(17.330±2.070)个,TNF-α基因相对表达量分别是(4.267±0.737)、(13.600±0.648)和(14.070±1.013),均高于对照组(P均<0.05);TNF-α蛋白相对表达量随PPD诱导时间的延长而不断增加,在第1、4和7天分别是(0.081±0.005)、(0.162±0.003)和(0.179±0.005),第4和7天均高于对照组的(0.066±0.004);TNF-α基因和蛋白与破骨细胞形成数量呈正相关(r=0.860、0.910,P均<0.001)。结论 TNF-α表达增高与破骨细胞形成之间关系密切。
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单位宁夏医科大学总医院; 宁夏医科大学