摘要
目的观察恶性胶质瘤患者肿瘤组织与血清微小RNA(miRNA,miR)-17-5p的表达,以及miR-17-5p对恶性胶质瘤细胞株U87MG和U251的体外作用。方法通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测恶性胶质瘤患者肿瘤组织与血清miR-17-5p的表达水平;将U87MG和U251细胞用化疗药物20μmol/L顺铂(DDP),50μmol/L替莫唑胺或30 Gy伽马射线处理后检测miR-17-5p表达变化;将U87MG和U251细胞转染miR-17-5p mimic,并用无血清培养,检测miR-17-5p在无血清条件对细胞存活的作用;将U87MG和U251细胞转染miR-17-5p mimic,测定其细胞增殖、细胞迁移、集落形成以及肿瘤蛋白p53可诱导核蛋白1(TP53INP1)、Tripartite基序蛋白8(TRIM8)和含BTB结构域的锌指蛋白(ZBTB4)蛋白表达量的变化。结果通过RT-qPCR检测可见恶性胶质瘤患者肿瘤组织(7.40±1.55)和血清(2.70±0.55)miR-17-5p的表达较癌旁组织和健康人血清明显升高(P=0.019和P=0.028),同时采用化疗药物20μmol/L DDP、50μmol/L替莫唑胺或30 Gy伽马射线处理U87MG和U251细胞后,其miR-17-5p的表达量也明显上升(P=0.001)。将U87MG和U251细胞转染miR-17-5p mimic,并用无血清培养结果表明,miR-17-5p能够促进U87MG和U251在无血清条件下的细胞存活,同时检测显示miR-17-5P在低浓度(2.5%)血清下可以促进U87MG和U251细胞迁移[(20.50±2.33)mm和(14.50±1.35)mm],促进U87MG和U251集落形成[(225±45)个和(312±58)个],而在高浓度血清(10%)条件下,miR-17-5p并不能促进U87MG和U251细胞迁移,反而会抑制细胞增殖,表明miR-17-5p能够降低抑癌基因TP53INP、TRIM8和ZBTB4蛋白表达。结论恶性胶质瘤患者血清和组织miR-17-5p表达增加,同时miR-17-5P对于恶性胶质瘤细胞株U87MG和U251在不良环境中的细胞生存具有促进作用。
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单位第一附属医院神经外科; 郑州大学