摘要

目的 探讨维生素E琥珀酸酯(VES)处理人胃癌SGC-7901细胞过程中自噬对细胞内抗氧化物质表达的影响。方法 不同剂量(0、5、10、15、20 μg/ml)VES处理人胃癌SGC-7901细胞24h,Westernblot检测自噬标志蛋白LC3和Beclin-1的表达情况,Real-timePCR检测细胞内抗氧化酶SOD、CAT和GPXmRNA的表达情况,ELISA检测GSH水平;RNA瞬时干扰阻断自噬关键基因BECN-1基因的表达后,以20 μg/mlVES处理人胃癌SGC-7901细胞24h,Real-timePCR检测抗氧化酶SOD、CAT和GPXmRNA的表达情况,ELISA检测GSH水平。结果 与对照组相比,随着VES作用剂量的增加,Beclin-1蛋白表达逐渐增高,可观察到LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ转化增加;Real-timePCR检测显示SOD、CAT和GPX等抗氧化酶的mRNA表达减少,ELISA显示细胞内GSH水平降低。阻断自噬关键基因BECN-1基因后,SOD、CAT和GPX等抗氧化酶的mRNA表达进一步减少(P<0.05),ELISA显示GSH水平进一步降低(P<0.05)。结论 VES可诱导人胃癌SGC-7901细胞发生自噬并降低细胞内抗氧化物质的水平,抑制自噬后抗氧化物质的表达水平进一步降低,提示自噬可缓解VES引起的细胞氧化应激。

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