采用IP-XL/MS技术研究SGC7901胃癌细胞中EGFR信号通路动态变化

作者：汲淑慧; 王旖旎; 汪宜; 秦钧^*

来源：军事医学, 2018, 42(04): 241-248.

• 胃肿瘤
• 表皮生长因子
• 免疫沉淀法
• IP-XL/MS
• 蛋白质转运
• 动态变化

目的研究胃癌细胞在表皮生长因子(EGF)刺激下表皮生长因子受体(EGFR)相互作用蛋白的时序性变化。方法筛选高表达EGFR的胃癌细胞系;EGF刺激不同时间后,利用甲醛固定免疫沉淀联合质谱(IP-XL/MS)技术对胃癌细胞中EGFR相互作用蛋白表达谱进行无标定量,捕获EGFR网络的动态变化。结果与结论 8种胃癌细胞系中,SGC7901细胞表达EGFR量最高。4次生物学重复实验,共鉴定到3728个蛋白,625个EGFR相互作用蛋白,包括已知的相互作用蛋白(GRB2、CBL、SHC1等),并发现59个新蛋白(ANKFY、LGR4、SNX3、VPS26A、ZFYVE20等)。ANOVA检验分析得到406个响应EGF刺激的差异表达蛋白,根据动力学变化可分成5个簇,其具有不同的生物学功能,如蛋白转运、內吞、囊泡循环和蛋白酶体输运等,共同参与EGFR信号传递的动态调控,交叉调节多条信号通路。

• 单位
  北京蛋白质组研究中心; 蛋白质组学国家重点实验室