S100A6 siRNA对卵巢癌细胞生物学行为的影响

作者：郑福利; 张颖; 赵亚宁; 党淼; 王建

来源：中国妇幼健康研究, 2014, 25(01): 48-51.

• 卵巢癌
• 钙结合蛋白S100A6
• 小干扰RNA
• 侵袭转移
• 顺铂

目的探讨S100A6蛋白表达对卵巢癌细胞生物学行为的影响。方法以卵巢癌细胞A2780为研究对象,利用RNA干扰技术特异性降低S100A6表达水平后,分别用实时定量PCR和Western blot检测S100A6 siRNA对S100A6表达水平的抑制效率。用流式细胞术检测S100A6 siRNA转染前后A2780细胞的细胞周期变化,用Transwell试验观察S100A6 siRNA转染前后侵袭能力的变化,用MTT法检测S100A6 siRNA对A2780细胞顺铂敏感性的影响。结果 S100A6 siRNA转染组细胞中S100A6mRNA和蛋白表达水平与S100A6 siRNA呈浓度、时间依赖性明显下调,抑制效率可达63.75%80.68%。在与空白对照组和阴性对照siRNA组相比,S100A6 siRNA出现了G0/G1期比例升高,S期比例降低,差异有统计学意义(χ2=6.211,P=0.045)。Transwell试验表明,6.25、12.5nmol/L S100A6 siRNA分别转染48h后,A2780细胞穿膜细胞数目分别为78±7.51和27±8.24,与阴性对照组(91±5.78)相比,穿膜细胞显著减少,差异有统计学意义(χ2=3.898,P=0.048)。MTT法测定S100A6 siRNA转染后A2780细胞对顺铂敏感性的影响结果显示,S100A6 siRNA引起顺铂对A2780细胞的抑制率增加(χ2=9.609,P=0.022),而空白对照组和阴性对照siRNA组之间无明显差异。对顺铂半数致死剂量(IC50)的计算结果显示,分别转染6.25、12.5nmol/L S100A6siRNA的A2780细胞对顺铂IC50值分别为13.42μmol/L和11.32μmol/L,与空白对照组和阴性对照siRNA组相比均显著降低,差异有统计学意义(χ2=5.566,P=0.018)。结论 S100A6 siRNA转染卵巢癌A2780细胞后,引起A2780细胞G0/G1期阻滞,侵袭能力降低,同时对顺铂的敏感性有所增强,可能是卵巢癌靶向治疗的候选基因。

• 单位
  陕西中医药大学; 第四军医大学; 西京医院