打靶恒河猴CD4+ T细胞的TRIM5α基因影响其感染HIV的能力

作者:王小莉; 余庆; 袁雅红; 腾智平; 李东升; 曾毅
来源:中国生物工程杂志, 2017, 37(02): 15-19.
DOI:10.13523/j.cb.20170203

摘要

目的:探讨打靶恒河猴CD4+ T细胞的TRIM5α基因对其感染HIV-1能力的影响。方法:从恒河猴的外周血中通过磁珠分选获得CD4+ T细胞,并采用流式检测阳性率。构建打靶TRIM5α基因的TALEN质粒,通过电转导入CD4+ T细胞,流式分选出转染TALEN质粒的细胞,提取基因组T7E1酶切检测打靶效率。HIV-1病毒感染打靶TRIM5α的CD4+ T细胞,并通过ELASA检测病毒感染的情况。结果:成功地从恒河猴的外周血中分选出了CD4+ T细胞,流式检测阳性率为99.5%。打靶TRIM5α基因的TALEN质粒转染CD4+ T细胞的转染效率约为24.8%,并可成功打靶TRIM5α,打靶效率约为40%。ELASA检测结果表明打靶TRIM5α的恒河猴CD4+ T细胞对HIV病毒的感染能力增强。结论打靶恒河猴CD4+ T细胞的TRIM5α基因可使其易感HIV病毒,为进一步建立恒河猴HIV-1感染动物模型奠定基础。

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